赤峰市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)布時(shí)間:2023-10-25 01:25:08
赤峰市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)
全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位?;蛐酒夹g(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個(gè)或幾個(gè)目標(biāo)基因,而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對大量目標(biāo)基因的同時(shí)檢測。隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價(jià)格昂貴等原因,預(yù)計(jì)熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

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化驗(yàn)室診斷方法采用的檢測依據(jù)有以下幾種:①國家標(biāo)準(zhǔn)以及農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn);②動(dòng)物疫病檢測的其他規(guī)范:③化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測方法。不管采用何種方法,都需要考慮化驗(yàn)室自身的條件及樣品類型,如在對偽狂犬病進(jìn)行診斷時(shí),實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀,沒有基因擴(kuò)增儀,在診斷時(shí)檢測人員可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行診斷。如果送檢樣品為血清,檢測人員則可以采用酶聯(lián)吸附試驗(yàn),而不需要采用動(dòng)物接種試驗(yàn)與病毒分離鑒定方法。

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隨著對動(dòng)物檢疫工作的發(fā)展與完善,僅依靠獸醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)檢查已經(jīng)不能滿足現(xiàn)今動(dòng)物疫病診斷的需求,因此,病理化驗(yàn)室開始發(fā)揮重要作用.如藍(lán)耳病的病原學(xué)檢測方式需要采集病豬的扁桃體,淋巴結(jié),肺,肝,脾等,利用10%的中性福爾馬林進(jìn)行固定,經(jīng)過石蠟切片,HE染色之后使用光鏡對樣本進(jìn)行病理學(xué)組織檢查得出結(jié)論,又如豬瘟的病理學(xué)檢查方式主要有免疫熒光實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),核酸探針技術(shù),基因芯片檢測技術(shù)等.

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動(dòng)物檢疫的分類:根據(jù)我國現(xiàn)行的動(dòng)物檢疫法律規(guī)定,我國動(dòng)物檢疫分為進(jìn)出境檢疫和國內(nèi).檢疫兩大類。①進(jìn)出境動(dòng)物檢疫。是指對進(jìn)出我國國境的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品,由口岸動(dòng)植物檢疫機(jī)關(guān)實(shí)施的檢疫。具體分為:進(jìn)境動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫;出境動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫;過境動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫;②國內(nèi)檢疫。指對國內(nèi)流動(dòng)的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品所進(jìn)行的檢疫。具體劃分為:產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫。

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人們生活水平不斷提升,對食品質(zhì)量安 全提出更高的要求,檢疫工作不斷深入與完善,僅依靠感觀檢查已遠(yuǎn)不能滿足當(dāng)今工作的需要,須使病理化驗(yàn)室發(fā)揮的作用.為更好地配合產(chǎn)地檢疫,屠宰檢疫及農(nóng)貿(mào)市場的肉食品檢疫,根據(jù)《動(dòng)物防疫法》,《食品衛(wèi)生法》,《定點(diǎn)屠宰管理辦法》及相關(guān)法律法規(guī)的精神,結(jié)合實(shí)際工作需要,高度重視動(dòng)物的防疫工作.而動(dòng)物疫病的診斷離不開先進(jìn)的技術(shù)和設(shè)備,該文主要圍繞動(dòng)物疫病診斷化驗(yàn)室操作中常見的問題進(jìn)行分析.

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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶,來源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴酶,反應(yīng)體系中須有Mg2+存在,然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要,因?yàn)镸g2+濃度過高或過低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。