松原市分子診斷試劑原材料優(yōu)質(zhì)
發(fā)布時(shí)間:2023-07-13 01:27:20
松原市分子診斷試劑原材料優(yōu)質(zhì)
加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)。地方各級(jí)人民政府對(duì)轄區(qū)內(nèi)動(dòng)物防疫工作負(fù)總責(zé),組織有關(guān)部門(mén)按照職責(zé)分工,落實(shí)強(qiáng)制免疫工作任務(wù)。省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門(mén)具體組織實(shí)施強(qiáng)制免疫,各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)開(kāi)展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)強(qiáng)制免疫效果評(píng)價(jià),各級(jí)承擔(dān)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)的機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))履行強(qiáng)制免疫義務(wù)情況。落實(shí)主體責(zé)任?!吨腥A人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》規(guī)定,飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人是免疫主體,承擔(dān)免疫責(zé)任。有關(guān)單位和個(gè)人應(yīng)自行開(kāi)展免疫或向第三方服務(wù)主體購(gòu)買(mǎi)免疫服務(wù),對(duì)飼養(yǎng)動(dòng)物實(shí)施免疫接種,并按有關(guān)規(guī)定建立免疫檔案、加施畜禽標(biāo)識(shí),確??勺匪?。

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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴(lài)于DNA模板的DNA聚合酶,來(lái)源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴(lài)酶,反應(yīng)體系中須有Mg2+存在,然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要,因?yàn)镸g2+濃度過(guò)高或過(guò)低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。

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熱啟動(dòng)通過(guò)抑 制一種基本成分延遲DNA合成,直到PCR 儀達(dá)到變性溫度。延緩加入Taq DNA 聚合酶的手工熱啟動(dòng)方法十分煩瑣,尤其是對(duì)高通量應(yīng)用。其他熱啟動(dòng)方法使用蠟防護(hù)層將一種基本成分(鎂離子、酶、模板、緩沖液等) 隔離開(kāi)。在熱循環(huán)時(shí),蠟熔化把各種成分釋放出來(lái)并混在一起。蠟防護(hù)層法同樣比較煩瑣,易于污染,不適用于高通量應(yīng)用。

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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則締合成異質(zhì)雙鏈的過(guò)程,稱(chēng)為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。2.聚合酶鏈反應(yīng)(即Polymerase chain reaction,PCR)原理:PCR是模板DNA,引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng),擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟:雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈(變性);在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)(退火);在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測(cè)技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測(cè)定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測(cè)和分析,所以又稱(chēng)為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域,出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等,所以改稱(chēng)生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢(shì)。

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在動(dòng)物疫病診斷標(biāo)準(zhǔn)等技術(shù)規(guī)范中,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)試驗(yàn)中加底物的反應(yīng)步驟進(jìn)行規(guī)定,規(guī)定固定的時(shí)間,然后加終止液。但是,在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中,加底物的反應(yīng)步驟需要根據(jù)陰性、陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)情況對(duì)反應(yīng)的時(shí)間進(jìn)行調(diào)整。如當(dāng)陰性與陽(yáng)性對(duì)照的反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)后,實(shí)驗(yàn)人員則可以加終止液。有關(guān)資料規(guī)定的時(shí)間可能太長(zhǎng)或者太短,這樣會(huì)對(duì)反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng),樣品則有可能呈現(xiàn)陽(yáng)性,易導(dǎo)致誤診情況的產(chǎn)生。